大家好,小君來為大家解答以上問題。電泳原理圖,電泳原理很多人還不知道,現(xiàn)在讓我們一起來看看吧!
1、大小不同的DNA片段在堿性條件下帶負(fù)電,在電流的作用下從負(fù)極向正極移動。根據(jù)不同DNA分子片段的大小和形狀不同,它們在電場中的游動速率也不同。因此,同時紫外線照射后可以看到DNA的位置,從而達(dá)到分離鑒定的目的。
2、瓊脂糖凝膠電泳步驟:1 .用蒸餾水清洗制膠工具,準(zhǔn)備制膠板,用瓊脂封住模具邊緣,設(shè)置梳子;2.根據(jù)待分離樣品(DNA)的大小,配制適當(dāng)濃度的瓊脂糖凝膠。準(zhǔn)確稱取一定量的干瓊脂糖粉末,置于適當(dāng)體積的錐形瓶中,加入一定量的電泳緩沖液(約30ml TAE);放入微波爐,加熱融化,冷卻一會兒(不要燙手)。
3、3.將融化的瓊脂溶液搖勻,倒入電泳槽中,等待凝固;4.室溫固化30-40分鐘左右,小心拔出梳子,取出固化的凝膠,放入電泳槽中,準(zhǔn)備上樣;5.將電泳緩沖液(TAE)倒入電泳槽中;距膠面約1毫米時,清除膠孔內(nèi)的氣泡。
4、6.上樣,在5ul DNA樣品中加入1ul上樣緩沖液和1ul染料,混合均勻,加入凝膠孔中;7.加載后,打開電源,紅色正極,黑色負(fù)極。DNA樣品從負(fù)極移動到正極,上樣孔側(cè)電壓為負(fù)40-50v,電壓約為30min(40min);8.電壓結(jié)束后,關(guān)閉電源,觀察凝膠成像儀上的電壓位置,并與標(biāo)記進行比較,判斷大小。
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