大家好,小堂為大家解答以上問(wèn)題。革蘭氏染色的注意事項(xiàng),革蘭氏染色的注意事項(xiàng)目前這個(gè)還是有很多人還不知道,現(xiàn)在讓我們一起來(lái)看看吧!
解答:
1、需要注意的事項(xiàng)
2、1.使用活性生長(zhǎng)菌株染色時(shí),老化的革蘭氏陽(yáng)性菌會(huì)被染成紅色,造成假陰性。
3、2.涂片不宜過(guò)厚,以免脫色不完全造成假陽(yáng)性。
4、3.脫色是革蘭氏染色成功的關(guān)鍵。脫色不足導(dǎo)致假陽(yáng)性,過(guò)度脫色導(dǎo)致假陰性。
5、實(shí)驗(yàn)過(guò)程
6、1.取玻片用紗布擦干,用Mark在玻片一側(cè)畫(huà)一個(gè)小圓圈(用于大致確定菌滴的位置)。在火焰上烘烤涂有細(xì)菌的部分,以去除油脂。
7、2.涂抹。
8、液體培養(yǎng)基:左手持菌液試管,在酒精燈火焰附近約5 cm處打開(kāi)試管蓋;右手拿著接種環(huán),在火焰中燃燒消毒。冷卻后,從試管中取出一圈菌液,在干凈無(wú)脂的載玻片上涂上直徑約2 mm的薄膜,最后將接種環(huán)在火焰中燃燒消毒。
9、固體培養(yǎng)基:首先在載玻片上滴一滴無(wú)菌水,然后取少量帶接種環(huán)的細(xì)菌,涂在載玻片上,使其變薄均勻。
10、3.風(fēng)干:讓涂抹物在空氣中自然風(fēng)干。
11、4.固定:讓膜面朝上,用火焰固定2-3次(最好不要燙傷手)。
12、5.染色:將固定好的涂片放在報(bào)紙上,滴草酸銨結(jié)晶紫溶液,染色1分鐘。
13、6.水洗:用水慢慢沖洗涂片上的染色液,用吸水紙吸干。簡(jiǎn)單染色后可觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)。
14、7.媒染:滴1滴碘溶液,染1分鐘,水洗。
15、8.脫色:吸收殘留水分,連續(xù)滴加95%乙醇脫色20-30秒,直至出水呈紫色,立即用水沖洗。
16、9.復(fù)染:滴加范宏復(fù)染3-5分鐘,水洗。此時(shí),革蘭氏染色結(jié)束。
本文到此結(jié)束,希望對(duì)大家有所幫助。